Real -Time PCR یا rtq-PCR


Real Time PCR
همانطوریکه از اسمش مشخص است، یک نوع PCR سینتیکی می باشد که در آن تکثیر و برآورد تکثیر همزمان صورت می گیرد.
اینکار بکمک انتقال یک مولکول فلورسانت به داخل واکنش انجام می گیرد، و بدین شکل ما می توانیم بوسیله یک software با مشاهده چشمی مراحل مختلف واکنش مورد نظر را دنبال کنیم.
مکانیزم برآورد سیگنال فلورسانت بستگی دارد به :
FRETQuencing (Fluoresence Resoance Energy Transfer

و به حضور یک مولکول R (Reporter که با رادیان خاصی القا شده و انرژی خود را به مولکول Q(Quencer منتقل می کند.
انرژی مورد نظر توسط Q بصورت رادیان نورانی انرژی منتشر می شود.
خاصیت این پروسه بستگی به فاصله موجود بین R و Q می باشد.

امتیازات این متد جدید:
1- حساسیت بالا
2- اختصاصی بودن
3- سریع بودن در جواب
4- در حین ثبت فلورسانت، واکنش PCR را هم تحت کنترل قرار می دهد.
5- اجازه یک نتیجه ی کمی با یک range وسیع را می دهد.
6- در پایان واکنش تکثیر نیازی به الکتروفورز و بلاتینگ نیست.
7- کاهش زمان آنالیز
8- کاهش ریسک آلودگی محیط به دلیل استفاده از کالیبراتورهای داخلی.


اپرون

/ 0 نظر / 13 بازدید